Resumo

Objetivos: Neste estudo, pretendemos determinar se a metilação do promotor do gene RASSF1A, detetada em ácido desoxirribonucleico derivado de células colhidas por lavagem oral é eficaz na deteção precoce de cancro oral e orofaríngeo. Materiais e métodos: Nesta investigação procedemos à recolha de amostras de lavado oral, efetuadas com solução salina, que foram analisadas no laboratório do Grupo de Epigenética e Biologia do Cancro do Centro de Investigação do IPO Porto para quantificar a metilação do promotor do gene RASSF1, que foi previamente associada à presença de neoplasia da cavidade oral e orofaringe. Esta quantificação foi realizada usando a técnica quantitativa específica da metilação da reação em cadeia da polimerase. O parâmetro de desempenho do biomarcador RASSF1A foi determinado individualmente. Para tal, foram analisadas cinquenta e duas amostras de indivíduos saudáveis acompanhados na Clínica da FMDUP. Resultados: Foram analisadas cinquenta e duas amostras. O rácio A260/A280, bem como, os valores de β-Actina indicam que o lavado oral permite a extração de uma grande quantidade de ácido desoxirribonucleico genómico, com alta pureza, permitindo análises moleculares subsequentes. Após amplificação da reação em cadeia da polimerase, o gene RASSF1A não teve amplificação em comparação com a refere?ncia (β-actina), o que significa que não há metilação de RASSF1A nas amostras. Conclusões: Marcadores baseados na metilação do ácido desoxirribonucleico, especificamente a metilação do promotor de RASSF1A, te?m o potencial de permitir a deteção precoce de cancro oral. O lavado oral permite a extração de grande quantidade de ácido desoxirribonucleico genómico, com alta pureza, permitindo análises moleculares subsequentes bem-sucedidas. Não foi detetada metilação do promotor RASSF1A nas amostras, sugerindo alta especificidade para deteção de cancro oral.