Resumo

Objetivos: Desenvolvimento de modelo organotípico tridimensional de mucosa oral (MMO) e caracterização da resposta em contacto com superfícies implantares de Zircónia revestidas com agregado trióxido mineral (MTA). Materiais e métodos: Foram produzidos 36 discos de zircónia estabilizada com ítria (Y- PSZ) texturizados por laser Nd:YAG. Posteriormente, metade dos discos foram incorporados com MTA (grupo MTA). Foram utilizados como grupo controlo os discos de Y-PSZ (grupo Y- PSZ). As amostras foram testadas no MMO com cultura de queratinócitos (FNB6) e fibroblastos (NOF) embebidos numa matriz de colagénio por 1 dia, e na cultura 2D de fibroblastos gengivais (HGF hTERT) por 7 dias. Na cultura 3D foi avaliada a análise histológica com coloração de hematoxilina e eosina e a citotoxicidade pela libertação de lactato desidrogenase (LDH) com técnica colorimétrica. Foi realizada microscopia eletrónica de varrimento (SEM) no modelo 2D e em ambos os modelos de cultura foi avaliada a viabilidade celular (método da resazurina) nos tempos pré- definidos. Todos os resultados foram apresentados como média±desvio padrão. Foram realizadas comparações entre grupos através de ANOVA ou teste de Mann-Whitney (teste post-hoc de Tukey) usando um software de estatística. A significância foi definida como p<0,05. Resultados: Histologicamente observou- se epitélio estratificado queratinizado com polaridade basal. Os fibroblastos apresentaram-se uniformemente distribuídos no tecido conjuntivo, com poucas células e a matriz extracelular apresentou-se corada de rosa. Não foi possível observar as papilas de tecido conjuntivo e as cristas epiteliais características do epitélio oral. A viabilidade celular dos grupos em estudo não apresentou diferenças estatisticamente significativas em ambos os modelos de cultura (p>0,05). Contudo, as amostras MTA apresentaram valores inferiores ao grupo Y-PSZ às 24h em ambos os modelos, sendo que aos 3 e 7 dias de cultura de fibroblastos a viabilidade foi superior no grupo MTA em comparação com o grupo de referência. O grupo MTA apresentou uma citotoxicidade de 25% e o grupo Y-PSZ de 16%, mas sem diferenças significativas (p>0,05). As imagens de SEM revelaram adesão dos corpos celulares dos fibroblastos em todas as amostras de forma homogénea. Conclusões: O modelo de mucosa oral tridimensional apresentado pode ser considerado uma hipótese válida para estudo de materiais dentários. Não foram observadas diferenças na resposta celular nas amostras com incorporação de MTA comparativamente com o controlo.